Informacja

Laboratorium 2: Technika aseptyczna — biologia

Laboratorium 2: Technika aseptyczna — biologia


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

W laboratorium będziesz pracować z wieloma chorobotwórczymi gatunkami bakterii. Pamiętaj, że bakterie znajdują się zarówno w powietrzu, jak i na skórze, blacie oraz wszystkich przedmiotach i sprzęcie, które nie zostały wysterylizowane. Najważniejszym narzędziem do przenoszenia kultur jest drut do zaszczepiania igły lub pętli. Można go szybko wysterylizować, podgrzewając go do czerwoności w płomieniu palnika Bunsena. Wyreguluj wloty powietrza do palnika tak, aby był cieplejszy stożek wewnętrzny i chłodniejszy płomień zewnętrzny. Suchą igłę można sterylizować trzymając ją pod kątem 30 stopni w zewnętrznej części płomienia. Mokrą pętlę z bakteriami należy najpierw trzymać w wewnętrznej części płomienia, aby uniknąć rozprysków, a następnie podgrzewać do czerwoności w zewnętrznej części płomienia. Zawsze zapalaj pętlę bezpośrednio przed i po użyciu! Pozwól mu ostygnąć przed pobraniem inokulum bakterii (lub zabijesz bakterie). Trzymaj pętlę lub druciany uchwyt jak ołówek.

Pamiętaj by:

1. Zawsze stawiaj lub przenoś probówki w stojaku.

2. Nie odkładaj nasadki ani niczego nią nie dotykaj.

3. Nie zdejmuj pokrywy niepotrzebnie ani przez dłuższy czas.

4. Zawsze kładź pokrywki płyt do dołu.

Jak zrobić pasmo dla izolowanych kolonii (SFIC):

Mieszane kultury (więcej niż jeden gatunek) można izolować techniką płytek posiewowych. Celem jest uzyskanie czystej kultury jednego gatunku bakterii, w jednej kolonii, z kultury mieszanej. Robimy to poprzez oddzielenie drobnoustrojów na powierzchni agaru za pomocą pasków ćwiartkowych, ta metoda ROZCIEŃCZY bakterie. Celem nie jest posiadanie bakterii we wszystkich czterech kwadrantach, ale raczej uzyskanie pojedynczych izolowanych kolonii.

Ćwiczenie

Ćwicz SFIC, używając ołówka zamiast pętli. Po włożeniu ołówka do „talerza” nie podnoś go ponownie. Upewnij się, że płoniesz między każdą ćwiartką.

Różne rodzaje mediów do wzrostu bakterii:

SLANT: podłoże stałe wykonane z agaru i różnych składników odżywczych i wskaźników. Pochylenie daje bakteriom większą powierzchnię, na której mogą rosnąć w probówce. Skosy agarowe są również przydatne w utrzymaniu kultur bakteryjnych, bardziej niż stosy szalek Petriego. Wiele kultur można łatwo umieścić w statywie na probówki i przechowywać w lodówce. Bakterie są inokulowane na skos za pomocą ezy i rosną na powierzchni agaru.

SLANT/DEEP: podłoże stałe wykonane z agaru oraz różnych składników odżywczych i wskaźników. Podobny do skosu, ale tworzy głęboką strefę, powszechnie nazywaną „tyłką”. Ten typ podłoża hodowlanego umożliwia namnażanie bakterii zarówno w środowisku tlenowym, bogatym w tlen (powierzchnia skosu), jak i beztlenowym z niedoborem tlenu (powierzchnia skosu). Skosy/głęboki są zaszczepiane przez wbicie igły w tyłek, a następnie natychmiastowe rozprowadzenie po powierzchni skosu.

DEEP: podłoże stałe wykonane z agaru i różnych składników odżywczych i wskaźników. Ten rodzaj kultury jest używany do wzrostu bakterii beztlenowych, które rosną bez dostępu tlenu i są zaszczepiane przez przekłucie podłoża igłą.

BROTH: płynna pożywka z różnymi składnikami odżywczymi i wskaźnikami. Pozwala na wzrost dużych objętości bakterii, poziom wzrostu można ocenić na podstawie zmętnienia (zmętnienia) kultury. Bakterie są inokulowane do bulionu za pomocą ezy.

BROTH+DURHAM TUBE: płynna pożywka z różnymi składnikami odżywczymi i wskaźnikami, w której umieszcza się odwróconą mniejszą rurkę, zwaną rurką Durhama. Rurki Durhama służą do wykrywania wytwarzania gazów, takich jak CO2 lub N2, przez mikroorganizmy. Probówka jest początkowo wypełniona medium, a następnie zbiera gaz w miarę wzrostu bakterii, tworząc bańkę. Bakterie są inokulowane do bulionu + probówki Durhama za pomocą ezy.

TALERZ: stałe podłoże wykonane z agaru i różnych składników odżywczych i wskaźników. Można przygotować na szalkach Petriego o różnych rozmiarach. Płytki są szczególnie pomocne w izolowaniu określonego gatunku bakterii, co nie jest możliwe w środowisku płynnym. Stosując technikę SFIC, bakterie można rozcieńczać do momentu utworzenia pojedynczych kolonii. Bakterie są inokulowane na płytkę za pomocą ezy

Notatka

Należy pamiętać, że pętla zbierze znacznie wyższe stężenia bakterii z płytki niż z bulionu. Dlatego stosując technikę SFIC, należy wziąć pod uwagę, z jakiego podłoża/pożywki pobierane są bakterie.

Aseptyczny transfer bakterii:

W TYM LABORATORIUM BĘDZIESZ PRACOWAĆ INDYWIDUALNIE

1. Otrzymasz Staphylococus epidermidis w bulionie i na talerzu. Zostaną one udostępnione przy stole i zostaną znalezione z przodu każdego stołu w białym plastikowym stojaku.

2. Oznacz 2 probówki z bulionem, 2 probówki skośne i 2 płytki.

3. Aseptycznie przenieś bakterie z kultury BROTH do bulionu, skosu i płytki za pomocą ezy.

Notatka

Odbędzie się test umiejętności w zakresie SFIC, a przyszłe dodatkowe możliwości kredytowe będą oparte na tej technice, upewnij się, że wiesz, jak to zrobić!

4. Aseptycznie przenieś bakterie z kultury PŁYTKI do bulionu, skosu i płytki

5. Płytki zostaną umieszczone w inkubatorze 37°C w pojemniku oznaczonym częścią laboratoryjną. Wszystkie probówki zostaną umieszczone w dostarczonych stojakach na końcu stołu. Kiedy twój stół jest gotowy, jeden z was będzie musiał umieścić ten statyw w inkubatorze 37°C. (jeśli przeczytałeś całą drogę do ostatniego kroku przed rozpoczęciem zaszczepiania, napisz swoje imię na kartce samoprzylepnej i przynieś instruktorowi za 1 pkt. dodatkowego kredytu)

Kształt i układ bakterii:

Bakterie opisywane są według trzech podstawowych kryteriów: wielkości, kształtu i rozmieszczenia. Jednostki używane do pomiaru organizmów widzianych pod mikroskopem to mikrometry (μm). Mikrometr to jedna milionowa metra. Większość drobnoustrojów ma wielkość około 1 μm. Wirusy mają zazwyczaj 1/10 tej wielkości. Komórki zwierzęce mają zazwyczaj wielkość około 10 μm. Trzy najczęstsze kształty to pręt (bacillus), kula (coccus) i typ spiralny (vibrio).

Aranżacja to sposób, w jaki grupy bakterii pojawiają się razem. Niektóre popularne typy aranżacji są sparowane (diplo), gronkowce (staphylo) lub łańcuchy (strepto).


Czym jest technika aseptyczna

Technika aseptyczna to zakres praktyk zapobiegania i kontroli zakażeń, które są stosowane w celu zminimalizowania obecności drobnoustrojów chorobotwórczych podczas procedur klinicznych. Wcześniej terminy „technika sterylna”, „technika czysta” i „technika aseptyczna” były używane zamiennie. Prawidłowa terminologia i praktyka to „technika aseptyczna”. „Technika aseptyczna” ma na celu zapobieganie przedostawaniu się drobnoustrojów chorobotwórczych do pacjenta przez ręce, powierzchnie i sprzęt. Technikę aseptyczną stosuje się podczas procedur klinicznych w celu identyfikacji i zapobiegania skażeniu mikrobiologicznemu aseptycznych części i miejsc poprzez zapewnienie, że nie są one dotykane ani bezpośrednio, ani pośrednio. Technika aseptyczna chroni pacjentów podczas inwazyjnych procedur klinicznych poprzez stosowanie środków kontroli infekcji, które minimalizują, na ile to praktycznie możliwe, obecność organizmów chorobotwórczych. Szeroko stosowana metoda techniki aseptycznej jest znana jako aseptyczna technika bezdotykowa (ANTT®). Aseptykę osiąga się poprzez ochronę kluczowych części i kluczowych miejsc przed mikroorganizmami przeniesionymi z pracownika służby zdrowia i najbliższego otoczenia. Na przykład podczas zakładania lub zmiany opatrunków stosuje się technikę aseptyczną, aby uniknąć wprowadzenia infekcji do rany 1 . Nawet jeśli rana jest już zakażona, należy zastosować technikę aseptyczną, ponieważ ważne jest, aby nie wprowadzać dalszych infekcji. Technikę aseptyczną należy stosować, gdy pacjent ma ranę chirurgiczną lub niechirurgiczną w oku lub wokół niego.

Niektóre przykłady procedur wymagających techniki aseptycznej obejmują:

  • przygotowanie i podanie dożylnie (IV) płynów lub leków
  • proste lub złożone opatrunki na rany
  • wprowadzenie cewników moczowych
  • wprowadzenie kaniuli dożylnej (IV) lub cewnika do żyły centralnej (CVC)
  • opróżnianie lub wymiana worków drenażowych

Sześć podstawowych elementów techniki aseptycznej z Aseptycznej Techniki Bez Dotyku (ANTT®):

  1. Higiena dłoni: ścisłe przestrzeganie skutecznego czyszczenia rąk przy użyciu metody systematycznej, wykonywanego przed, w razie potrzeby w trakcie zanieczyszczenia oraz po inwazyjnych procedurach klinicznych 2)
  2. Prawidłowe użycie rękawic: odpowiednie stosowanie rękawic i innego sprzętu ochrony osobistej w celu ograniczenia przenoszenia szkodliwych mikroorganizmów 3)
  3. Ochrona części klucza i miejsca klucza: metoda identyfikacji i bezwzględnego niedotykania i ochrony przed zanieczyszczeniem dotykowym najbardziej krytycznych części sprzętu zabiegowego 4)
  4. Technika bezdotykowa: umiejętność nie dotykania żadnych krytycznych części lub miejsca (miejsc) inwazyjnej procedury klinicznej 5)
  5. Dezynfekcja części kluczowych: dezynfekcja najbardziej krytycznych części sprzętu zabiegowego, które mogą stanowić port wejścia dla szkodliwych mikroorganizmów 6)
  6. Aseptyczne zarządzanie terenem: wybór odpowiednich typów pól aseptycznych w celu ochrony kluczowych części sprzętu zabiegowego przed i w trakcie inwazyjnych procedur klinicznych 7)

Kluczowe strony to jakiekolwiek naruszenia integralności skóry, które mogą stanowić portal wejściowy dla drobnoustrojów do kolonizacji pacjenta. Obejmuje to rany i miejsca nakłuć.

Kluczowe części to wszelkie części sprzętu, które wchodzą w kontakt ze sprzętem zabiegowym lub pacjentem. Obejmuje to urządzenia inwazyjne podłączone do pacjenta oraz wlewy płynne. Przykłady obejmują:

Jeśli kluczowe części ulegną skażeniu, mogą przenosić mikroorganizmy na pacjenta.

Jaki jest cel techniki aseptycznej?

Technika aseptyczna jest ważną kompetencją zapobiegania zakażeniom, chroniącą pacjentów przed zakażeniami związanymi z opieką zdrowotną 8 .


Obejrzyj wideo: Diagnostyka molekularna laboratorium na Wydziale Biologii (Styczeń 2023).