Opcjonalnie

Reakcja łańcuchowa polimerazy - PCR



PCR: ważna technika genetyczna

Co to jest (definicja)

Technika PCR oparta jest na amplifikacji - in vitro - pojedynczej sekwencji DNA miliony razy.

Zasadniczo wykonuje kilka kopii interesującego fragmentu DNA, który będzie badany.

Przykład

Gdybyśmy spojrzeli tylko na DNA wyekstrahowany z komórki, niezwykle trudno byłoby znaleźć interesujący fragment; Innymi słowy, identyfikacja tej konkretnej części DNA byłaby prawie niemożliwa.

Mówiąc wprost: można powiedzieć, że za pomocą techniki PCR można „nucić” i widzieć tylko tę część, która ma znaczenie.

Aplikacje

Zastosowania techniki PCR są liczne i dotyczą najróżniejszych obszarów. Oto kilka przykładów:

- Diagnoza chorób zakaźnych i genetycznych;

- Określenie zmienności genetycznej;

- Określanie płci zarodków;

- Badanie ekspresji genów;

- dochodzenie kryminalistyczne;

- Określenie pochodzenia zwierzęcego;

- Identyfikacja patogenów, ojcostwa itp.

Jak to sie dzieje

PCR przebiega w trzech etapach i wszystkie zależą od gradientu temperatury.

Krok 1: Denaturacja (w 95 ° C) podwójnej nici DNA, która następuje z powodu wzrostu temperatury.

Krok 2: Gruntowanie (57ºC do 63ºC) podkładów, które może wystąpić w zakresie temperatur od 57ºC do 63ºC.

Etap 3: Przedłużenie (w 72 ° C) za pomocą polimerazy Taq, która pomaga we wprowadzeniu nukleotydów, które uzupełnią syntetyzowany łańcuch.

Wniosek

Normalna PCR ma około 36 cykli, z których każdy obejmuje trzy etapy opisane powyżej. I z każdym cyklem następuje wykładnicze namnażanie lub amplifikacja ilości cząsteczek DNA.

Na przykład, jeśli w pierwszym cyklu rozpoczniemy PCR tylko z jedną cząsteczką DNA, na końcu będziemy mieć dwie cząsteczki. Pod koniec drugiego cyklu będziemy mieć cztery. Pod koniec trzeciej będziemy mieli osiem cząsteczek i tak wykładniczo.

Do końca 36 cykli będziemy mieli miliardy kopii DNA, które można przeanalizować w laboratorium. Ta analiza odbędzie się za pomocą Elektroforeza.

Wideo: PCR - sposób na DNA PCR - way to DNA - Damian Sojka, ADAMED SmartUP (Lipiec 2020).